Anemia hemol��tica causada por Indigofera suffruticosa (Leg. Papilionoideae) em bovinos

As partes a��reas de Indigofera suffruticosa Mill. (fam��lia Leg. Papilionoideae), planta incriminada pelos criadores de diversas ��reas do Nordeste por doen��a caracterizada por hemoglobin��ria em bovinos, foram administradas por via oral a seis bovinos, em doses di��rias repetidas de 10 a 40 g/kg, Todos os animais experimentais apresentaram hemoglobin��ria, por��m passageira, apesar continuidade da administra����o da planta. Dois desses bovinos n��o apresentaram manifesta����es adicionais, um terceiro animal evidenciou manifesta����es leves, e os tr��s outros, sintomas adicionais de intensidade moderada: apatia, mucosas vis��veis de colora����o esbranqui��ada, p��los arrepiados, anorexia, diminui����o da freq����ncia e intensidade dos movimentos ruminais, taquicardia, pulso venoso positivo e dispn��ia. Antes da crise hemol��tica a urina apresentava colora����o verde azulada. Nenhum animal experimental morreu, por��m um foi sacrificado durante a fase hemoglobin��rica. �� necropsia observaram-se anemia, bexiga contendo urina cor de vinho tinto, rins aumentados de volume com colora����o marrom-escura, f��gado, na superf��cie e ao corte, de colora����o azulada com lobula����o percept��vel. As principais altera����es histol��gicas foram verificadas no f��gado, sob forma de necrose coagulativa e tumefa����o e/ou microvacuoliza����o citoplasm��tica dos hepat��citos, e no rim representadas por acentuada nefrose, associada a grande quantidade de filtrado e/ou hemoglobina nos espa��os de Bowman dentro de t��bulos e do citoplasma das células epiteliais.

Quadro cl��nico-patol��gico do envenenamento crot��lico experimental em bubalinos comparado com o de bovinos

O estudo teve por objetivo verificar a sensibilidade dos bubalinos �� pe��onha de Crotalus durissus terriiicus, estudar o quadro cl��nico-patol��gico e laboratorial nessa esp��cie e estabelecer compara����es com o verificado em bovinos. A inocula����o do veneno liofilizado de Crotalus durissus terriiicus, dilu��do em 1ml de solu����o fisiol��gica, foi feita na regi��o da articula����o ��mero-r��dio-ulnar, por via subcut��nea, em tr��s bubalinos (doses de 0,015; 0,03; e 0,066mg/kg) e em dois bovinos (doses de 0,03 e 0,066mg/kg). O bubalino que recebeu a dose de 0,03mg/ kg apresentou sinais cl��nicos graves recuperou-se seis dias ap��s, e o bovino que recebeu a mesma dose morreu com evolu����o de 22h56min. A dose de 0,066mg/kg causou a morte tanto do bovino quanto do bubalino, com evolu����o cl��nica de 4h23min e 8h12min, respectivamente. O bubalino que recebeu a dose de 0,015mg/kg, recuperou-se com evolu����o de 48 horas. Os sinais cl��nicos tiveram in��cio dentro de 3h58min no bubalino que morreu, e nos bubalinos que adoeceram mas se recuperaram, dentro de 17h25min e 24h00min ap��s a inocula����o do veneno. Nos dois bovinos que morreram (com doses de 0,03 e 0,066mg/kg), os primeiros sinais cl��nicos foram observados 6h10min e 6h31min ap��s a inocula����o do veneno. A inocula����o do veneno produziu nos b��falos e bovinos um quadro nervoso de paralisia fl��cida. Os principais sinais observados tanto nos b��falos quanto nos bovinos, foram discreto aumento de volume no local da inocula����o, dificuldade respirat��ria caracterizada por respira����o predominantemente abdominal, apatia, sialorreia, dificuldade para se levantar quando estimulados, evolu����o para dec��bito esternal permanente, seguido de dec��bito lateral e movimentos de pedalagem, e diminui����o dos reflexos relacionados aos pares de nervos cranianos. Nos bubalinos adicionalmente foi observado aumento da base de sustenta����o, arrastar das pin��as dos membros posteriores, marcha lenta e cambaleante, dificuldade na apreens��o dos alimentos; nos bovinos ainda foram observados paralisia do globo ocular, revelada atrav��s da n��o exposi����o da esclera durante a rota����o da cabe��a na dire����o latero-caudal. Tanto nos bovinos quanto nos bubalinos, verificou-se no leucograma, leucocitose por neutrofilia, e na bioqu��mica s��rica, aumento nos n��veis de alanina aminotransferase, aspartato aminotransferase, creatinaquinase e dehidrogenase l��ctica. N��o houve altera����es na urin��lise, nem no tempo de ativa����o da protrombina e nem no tempo de tromboplastina parcial ativada. �� necropsia evidenciou-se apenas discreto edema correspondente ao local da inocula����o em um bovino. Os achados histopatol��gicos observados foram picnose nos n��cleos de células epiteliais de alguns t��bulos urin��feros no c��rtex renal (em um b��falo e um bovino) e f��gado com leve vacuoliza����o de hepat��citos (em um bovino).

Efeito do estradiol e da progesterona no desenvolvimento e na qualidade de embri��es bovinos produzidos in vitro

Avaliaram-se o desenvolvimento e a qualidade de embri��es bovinos, cocultivados com células epiteliais do oviduto bovino (CEOBs) expostas ou n��o ao estradiol e �� progesterona. Os ov��citos foram maturados in vitro por 24h e, ent��o, fertilizados utilizando-se s��men congelado, em estufa de CO2 a 5% e 38,5oC. As CEOBs foram cultivadas em TCM-199 com ou sem estradiol (E2) (24 horas), nas mesmas condi����es da matura����o e fertiliza����o in vitro (MIV e FIV), e, em seguida, adicionadas aos diferentes grupos em CR2 com ou sem progesterona (P4) (G1=P4+E2); (G2=E2); (G3=P4) e (G4=controle). Ap��s 18h da FIV, as células foram cultivadas nos diferentes sistemas. Nenhuma diferen��a (P>0,05) foi observada nas taxas de clivagem entre G1, G2 e G4 (53,5%; 56,3%; 51,7%) e nos padr��es de blastocistos (BLs) (29,3%; 31,2%, 28,7%). ��ndices menores (P<0,05) foram obtidos no G3 para ambas as vari��veis (34,5%; 16,4%). G1 e G2 apresentaram taxas de eclos��o maiores (P<0,05) que os outros grupos (23,3%; 23,2%), sendo G4 (19,3%) diferente de G3 (16,1%). Em G1, G2 e G3, o n��mero de células nos BLs aumentou 125,9; 128,4 e 123,6, respectivamente (P<0,05), em rela����o ao G4 (112,5). Conclui-se que o tratamento das CEOBs com o E2, nas primeiras 24 horas de cultivo, pode ser usado isoladamente ou em combina����o com a progesterona, a fim de melhorar a qualidade de embri��es bovinos produzidos in vitro.

Marcadores imunol��gicos na exposi����o mercurial na Regi��o Amaz��nica

Disfun����es imunes podem surgir pela combina����o entre susceptibilidade gen��tica e fatores ambientais. Existem evid��ncias, em humanos expostos ao merc��rio (Hg), de altera����es da resposta imunol��gica por auto-anticorpos induzidos por Hg. Este trabalho investigou a ocorr��ncia de auto-imunidade induzida por Hgtotal entre indiv��duos ribeirinhos da regi��o do Tapaj��s (Bras��lia Legal, S��o Luiz do Tapaj��s e Barreiras), expostos ao Hgtotal, e da comunidade ribeirinha da regi��o do Tocantins (Panacauera) n��o exposta ao Hgtotal. No per��odo de junho de 2004 a dezembro de 2006 foram coletadas 236 pares de amostras de cabelo e sangue, nas quais a concentra����o de Hgtotal no cabelo foi determinada por espectrofotometria de absor����o at��mica, e no soro, os auto-anticorpos foram analisados por microscopia de imunofluoresc��ncia (IF) usando substrato de células epiteliais humanas (Hep-2). Os mais altos n��veis de Hgtotal no cabelo foram os de S��o Luiz do Tapaj��s (11,24 �� 2,23 ��g/g), seguido por Bras��lia Legal (10,00 �� 0,99) e Barreiras (8,64 �� 1,13), e os mais baixos foram os de Panacauera (2,98 �� 0,20). Em rela����o �� vari��vel sexo, foi observada associa����o somente em Bras��lia Legal, com n��veis de Hgtotal mais altos no cabelo dos homens. Cerca de 79,65% ribeirinhos do Tapaj��s e 31,25% da regi��o do Tocantins apresentaram no soro autoanticorpos induzidos por Hg. Os padr��es de auto-anticorpos identificados por IF foram: misto (50,96%), nuclear (31,21%), nucleolar (14,65%) e aparelho mit��tico/citoplasm��tico (3,18%), observando-se maior preval��ncia dos padr��es misto e nuclear nas comunidades expostas (p<0,01). Os auto-anticorpos mais freq��entes foram, por ordem de preval��ncia: NuMa1, PM/Scl, Ssa-Ro, rRNP/Sm, golgi/Ssa/Ro, PCNA, rRNP, Ku, al��m de outros auto-anticorpos com especificidade ainda n��o definida. A intensidade de IF (p< 0,0001) foi mais reativa nos ribeirinhos do Tapaj��s. An��lise por regress��o log��stica m��ltipla indicou que o risco de apresentar auto-anticorpos foi aproximadamente duas vezes maior nos expostos ao merc��rio com faixa et��ria acima de 50 anos (p>0,01). Finalmente, estudos adicionais s��o indispens��veis para confirmar a especificidade destes auto-anticorpos induzidos pela exposi����o mercurial, bem como elucidar os mecanismos imunotoxicol��gicos da a����o do merc��rio sobre o sistema imune humano.

Intoxica����o por Ipomoea carnea subsp. fistulosa (Convolvulaceae) em caprinos na Ilha do Maraj��, Par��

Ipomoea carnea subsp. fistulosa �� uma planta que cont��m swainsonina causando doen��a de dep��sito lisossomal em ruminantes, principalmente em caprinos na regi��o Nordeste do Brasil. Para o estudo das plantas t��xicas da Ilha de Maraj��, foram visitadas sete propriedades rurais na Ilha de Maraj��, seis localizadas no munic��pio de Cachoeira do Arari e uma no munic��pio de Soure. Em todas as propriedades visitadas as pastagens eram constitu��das de campo nativo, tinham pouca disponibilidade de forragem e I. carnea subsp. fistulosa encontrava-se em grande quantidade. Nas tr��s propriedades onde eram criados caprinos foram observados animais com sinais nervosos, incluindo tremores de inten����o, aumento da base de sustenta����o quando em esta����o, ataxia, hipermetria, nistagmo, paresia esp��stica ou debilidade, altera����es posturais, perda de equil��brio e quedas. Em duas fazendas a preval��ncia foi de 32% (23/71) e 100% (32/32) e em outra havia um animal com sinais acentuados e o resto do rebanho, de 19 caprinos, n��o foi examinado clinicamente. Bovinos, ovinos e bubalinos n��o foram afetados. Foram eutanasiados e necropsiados seis caprinos que apresentavam sinais cl��nicos acentuados. Macroscopicamente n��o foram observadas altera����es. Na histologia observou-se vacuoliza����o do peric��rio de neur��nios e do citoplasma de células epiteliais da tire��ide, rim, f��gado, p��ncreas e macr��fagos de diversos ��rg��os. No sistema nervoso central a vacuoliza����o era mais grave nos neur��nios de Purkinje do cerebelo e nos neur��nios dos n��cleos cerebelares e do tronco encef��lico. Observaram-se tamb��m degenera����o walleriana dos ax��nios e gliose. A alta freq����ncia da intoxica����o nas tr��s fazendas que criavam caprinos sugere que a intoxica����o por I. carnea subsp. fistulosa �� muito importante para caprinos na Ilha de Maraj��, onde h�� abundante quantidade da planta, que permanece verde durante todo o per��odo seco.

Intoxica����o natural e experimental por Metternichia princeps (Solanaceae) em caprinos

Entre os anos de 2007 e 2009 ocorreu uma doen��a nefrot��xica de evolu����o subaguda com alta mortandade em caprinos em uma propriedade no munic��pio de Itagua��, estado do Rio de Janeiro. Levantou-se a suspeita de que Metternichia princeps, planta pertencente �� fam��lia Solanaceae, seria a causa. Atrav��s de experimenta����o em caprinos o quadro cl��nico-patol��gico de intoxica����o por esta planta e a dose letal foram estabelecidos. Na experimenta����o foram utilizados 12 caprinos de diferentes ra��as, de ambos os sexos, jovens a adultos, com pesos acima de 15 kg. Os animais que receberam as doses de 30g/kg em 5 dias, 15g/kg em 3 dias, doses ��nicas de 10g/kg e de 5g/kg, morreram. Dos tr��s animais que receberam as doses ��nicas de 2,5g/kg, dois morreram e um n��o apresentou sinais cl��nicos e o animal que recebeu a dose ��nica de 1,25g/kg, tamb��m n��o apresentou sinais cl��nicos. O in��cio dos sinais cl��nicos ap��s a administra����o da planta variou entre 7h e 46h45min. A evolu����o variou entre 3h6min e 126h40min. Os primeiros sinais cl��nicos apresentados foram inapet��ncia, adipsia, apatia e relut��ncia ao movimento. Em seguida os animais entravam em dec��bito esternal e ao serem colocados em esta����o, mantinham os membros anteriores flexionados, apoiavam apenas os posteriores no ch��o at�� evolu��rem para flex��o dos quatro membros e seguia-se o dec��bito lateral. �� necropsia destacaram-se o edema de tecido adiposo perirrenal, rins p��lidos e, ao corte, com estria����o esbranqui��ada desde o c��rtex at�� a regi��o medular. �� histopatologia foi verificada acentuada necrose coagulativa das células epiteliais dos t��bulos urin��feros. Comparativamente aos casos naturais, os caprinos intoxicados experimentalmente por M. princeps apresentaram quadro cl��nico-patol��gico semelhante. Desta maneira foi comprovado que Metternichia princeps �� respons��vel pela doen��a nefrot��xica em caprinos no Rio de Janeiro; a menor dose que causou a morte dos caprinos nos experimentos foi 2,5g/kg.

Surtos de Enteropatia Proliferativa Hemorr��gica (Lawsonia intracelullaris) em su��nos no Estado do Rio de Janeiro

Descrevem-se surtos de Enteropatia Proliferativa Hemorr��gica causados por Lawsonia intracellularis em su��nos no Estado do Rio de Janeiro. A sintomatologia caracterizou-se por diarr��ia sanguinolenta com evolu����o superaguda. �� necropsia verificaram-se ��leo de aspecto reticulado, com mucosa moderadamente espessada e grande quantidade de sangue parcialmente coagulado, al��m de marcada palidez de ��rg��os e carca��a. O exame histol��gico revelou prolifera����o hiperpl��sica das células epiteliais das criptas de Lieberk��hn, por vezes, associada a altera����es inflamat��rias e necr��ticas. A imunohistoqu��mica demonstrou presen��a da bact��ria, em grande quantidade, dentro do citoplasma das células epiteliais das criptas. L. intracellularis tamb��m foi visualizada pela ultramicroscopia. Os surtos ocorreram em 1987 e essa �� a primeira descri����o da enfermidade no Estado do Rio de Janeiro.

Les��es cut��neas tipo tumorais associadas �� infec����o por avipoxvirus em uma marreca-cabocla (Dendrocygna autumnalis)

O setor de reabilita����o de aves selvagens do Parque Mangual das Gar��as, localizado em Bel��m, Par��, recebeu um esp��cime de Marreca-cabocla (Dendrocygna autumnalis). O animal apresentava les��es nodulares em regi��es desprovidas de penas na asa, que consistiam de dois grandes n��dulos cut��neos de aspecto tumoral, que mediram 4,2 x 3,8 cm e 2,8 x 2,2 cm de comprimento e largura, respectivamente. Os n��dulos foram removidos cirurgicamente, fixados em formol a 10%, e as amostras foram processadas para histopatologia, coradas pela hematoxilina-eosina. Na an��lise histopatol��gica, observaram-se acantose e expressiva hiperceratose; v��rias células mostraram espongiose. O diagn��stico da bouba foi estabelecido pelo sinal patognom��nico da presen��a de grandes corp��sculos de inclus��o eosinof��licos intracitoplasm��ticos (corp��sculos de Bollinger) nas células epiteliais da les��o tumoral. Este �� o primeiro relato de infec����o por poxv��rus em ave selvagen no Estado do Par��, Brasil.

Estudo da frequ��ncia das neoplasias intra-epiteliais cervicais em mulheres portadoras do v��rus da imunodefici��ncia humana

Dentre as manifesta����es ginecol��gicas mais importantes nas mulheres soropositivas para o HIV, est��o o c��ncer do colo uterino e as neoplasias intra-epiteliais cervicais que lhe s��o as les��es precurssoras. Neste estudo foram analisadas 36 mulheres soropositivas para o v��rus da imunodefici��ncia humana e 54 soro negativas, com a finalidade de analisar a freq����ncia de les��es precursoras do c��ncer uterino cervical. Todas as pacientes foram submetidas ao exame cl��nico ginecol��gico, colheita de colpocitologia c��rvico-vaginal, colposcopia e �� bi��psia genital quando o exame colposc��pico revelava achados anormais. Nas pacientes soropositivas foram quantificados os linf��citos com receptores CD4 e verificado a ader��ncia ao esquema antiretroviral. Os resultados demonstraram que a freq����ncia das neoplasias intra-epiteliais cervicais foi semelhante nos dois grupos estudados. Observamos ainda que a maioria das pacientes soropositivas apresentavam contagem de CD4 acima de 200 células / mm3, ou seja eram consideradas imunocompetentes. E que trinta e tr��s pacientes das trinta e seis estudadas eram aderentes ao esquema antiretroviral. Conclu��mos que as mulheres HIV soropositivas consideradas imunocompetentes e em uso de antiretrovirais apresentaram freq����ncia de neoplasias intraepiteliais cervico-uterinas semelhantes ��s mulheres soro negativas inclu��das neste estudo. Observamos, ainda, que o HPV �� importante cofator no desenvolvimento das neoplasias intra-epiteliais cervicais.

Determina����o de puberdade em cutias (Rodentia:Dasyproctidae) criadas em cativeiro, atrav��s da quantifica����o das células espermatog��nicas

A cutia (Dasyprocta spp) �� um roedor de m��dio porte, que apresenta o h��bito de enterrar parte de seus alimentos, principalmente sementes, �� considerado um dispersor em potencial, pois contribui com o reflorestamento natural. Por ser uma esp��cie muito procurada para consumo na ��rea rural da Amaz��nia, o manejo em cativeiro e o conhecimento dos seus aspectos reprodutivos s��o formas alternativas para a cria����o de programas de produ����o e preserva����o dessa esp��cie com potencial econ��mico. O objetivo do presente trabalho, foi determinar o per��odo que ocorre a puberdade, caracterizar os est��dios do Ciclo do Epit��lio Semin��fero (CES), determinar a freq����ncia relativa dos est��dios, calcular o rendimento geral da espermatog��nese e o ��ndice das células de sertoli. Foram utilizados 7 grupos com idade variando de 4 a 17 meses, os animais foram divididos em G1 (4 e 5 meses, n=4), G2 (6 e 7 meses, n=4), G3 (8 e 9 meses, n=4), G4 (10 e 11 meses, n=3), G5 (12 e 13 meses, n=4), G6 (14 e 15 meses, n=3) e G7 (16 e 17 meses, n=2). Ao atingir a idade programada os animais foram castrados, sob anestesia, e as amostras testiculares ap��s biometria foram fixadas em ALFAC por 24 horas, submetidas ao processamento histol��gico de rotina, foram realizados cortes de 5 mm de espessura e os tecidos obtidos corados com HE. As fases de desenvolvimento reprodutivo, incluindo a puberdade, foram determinadas atrav��s da quantifica����o das células espermatog��nicas de 10 t��bulos semin��feros/animal com o contorno circular, os quais se encontravam no est��dio I do CES, previamente caracterizado pelo m��todo da morfologia tubular, que apresentou oito est��dios do CES, e de 20 t��bulos semin��feros/animal que n��o apresentavam espermatog��nese completa, o n��mero real das células foi obtido atrav��s da corre����o dos n��meros brutos pelo di��metro nuclear/nucleolar m��dio e espessura do corte histol��gico. Para determinar a freq����ncia relativa, 100 t��bulos semin��feros de cada animal que j�� havia atingido a puberdade foram analisados. Os pesos corporal e testicular apresentaram correla����es significativas com a idade e entre si. O peso corporal e biometria testicular aumentaram significativamente (P<0.05) at�� a maturidade sexual, onde na puberdade o PC e PT foram (1.903 + 0.55 Kg; 1.8 + 1.4 g, respectivamente) e na fase adulta foram (2.825 + 0.11Kg; 6.1 + 0.37g). Os grupos analisados foram classificados como G1 imp��bere (13.21 + 1.6 mm); G2 pr��-puberdade (7.09 + 1.7 mm); G3 puberdade (93.82 + 58.7 mm); G4 P��s-puberdade 1 (164.03 + 10.03 mm); G5 e G6 P��s-puberdade 2 de fase longa (173.8 + 10.5 mm; 185.9 + 1.5 mm) e G7 Adulto (238.8 + 72.6 mm). As células de sertoli, diminuiram significativamente (P<0.05) da fase imp��bere (21.7 + 3.5 mm) at�� a puberdade (9.7 + 4.2 mm) onde iniciaram sua estabiliza����o at�� a fase adulta (9.03 + 0.01mm). As células espermatog��nicas apresentaram correla����es altas e significativas com o peso testicular. As m��dias das se����es transversais do di��metro tubular aumentaram significativamente (P<0.05) entre os grupos analisados, G1 (109.5 + 4.6 mm); G2 (119.7 + 10 mm); G3 (174.6 + 24.1 mm); G4 (240.9 + 14.1 mm); G5 (219.6 + 9.8 mm); G6 (221.1 + 7.9 mm) e G7 (258.1 + 55.3 mm). Ap��s a an��lise de 1600 t��bulos semin��feros, os oito est��dios caracterizados pelo m��todo da morfologia tubular apresentaram as seguintes freq����ncias relativas: I (16.8 + 2.3%); II (18.8 + 3.4%); III (7.6 + 1.3%); IV (11.1 + 1.2%); V (21.2 + 4.2%); VI (10.4 + 3.4%); VII (7.9 + 2.4%); VIII (6.4 + 1.4%). A freq����ncia conjunta dos est��dios foi pr��-mei��tica (43.5%), mei��tica (10.7%) e p��s-mei��tica (45.8%). Portanto, a puberdade em cutias �� alcan��ada no per��odo de 8 e 9 meses, onde se observa maior produ����o das células espermatog��nicas e estabelecimento das células de sertoli, a partir dessa fase inicia-se uma tentativa de estabiliza����o das células espermatog��nicas, o qual �� acompanhado por uma tend��ncia a estabiliza����o do crescimento testicular.

3�� Consenso Brasileiro para pesquisa de autoanticorpos em células HEp-2 (FAN): recomenda����es para padroniza����o do ensaio de pesquisa de autoanticorpos em células HEp-2, controle de qualidade e associa����es cl��nicas

O 3�� Consenso Brasileiro para pesquisa de autoanticorpos em Células HEp-2 (FAN) teve como prop��sito avaliar as dificuldades de implanta����o do 2�� Consenso ocorrido no ano de 2002, discutir estrat��gias para controlar a qualidade do ensaio e promover a atualiza����o das associa����es cl��nicas dos diversos padr��es. M��TODOS: Participaram do encontro em Goi��nia nos dias 13 e 14 de abril de 2008 pesquisadores e especialistas de diversos centros universit��rios e laborat��rios cl��nicos de diferentes regi��es do Brasil, com o prop��sito de discutir e aprovar as recomenda����es que visam �� melhor padroniza����o, interpreta����o e utiliza����o do ensaio pelos cl��nicos. Representantes comerciais de diferentes empresas produtoras de insumos para realiza����o do teste de FAN foram convidados como ouvintes. RESULTADOS E CONCLUS��ES: O 3�� Consenso enfatizou a necessidade do controle de qualidade em imunofluoresc��ncia dada a heterogeneidade de microsc��pios e reagentes dispon��veis no mercado, promoveu adequa����es na terminologia utilizada para classificar os diferentes padr��es e, finalmente, atualizou as associa����es cl��nicas com finalidade de facilitar cada vez mais o melhor uso do ensaio pelos cl��nicos.

III Consenso Brasileiro para Pesquisa de Autoanticorpos em Células HEp-2: perspectiva hist��rica, controle de qualidade e associa����es cl��nicas

OBJETIVO: O III Consenso Brasileiro para Pesquisa de Autoanticorpos em Células HEp-2 (FAN) objetivou discutir estrat��gias para controlar a qualidade do ensaio, promover a atualiza����o das associa����es cl��nicas dos diversos padr��es e avaliar as dificuldades de implanta����o do II Consenso ocorrido no ano de 2002. M��TODOS: Nos dias 13 e 14 de abril de 2007 participaram do encontro em Goi��nia pesquisadores e especialistas de diversos centros universit��rios e laborat��rios cl��nicos de diferentes regi��es do Brasil, com o prop��sito de discutir e aprovar as recomenda����es que visam a melhores padroniza����o, interpreta����o e utiliza����o do ensaio pelos cl��nicos. Foram convidados como ouvintes representantes comerciais de diferentes empresas produtoras de insumos para realiza����o do teste de FAN. RESULTADOS E CONCLUS��O: Dada a heterogeneidade de microsc��pios e reagentes dispon��veis no mercado, o III Consenso enfatizou a necessidade do controle de qualidade em ensaios de imunofluoresc��ncia indireta. Foram tamb��m feitas algumas adequa����es na terminologia utilizada para classificar os diferentes padr��es. Finalmente, foi realizada uma atualiza����o das associa����es cl��nicas com finalidade de facilitar cada vez mais o melhor uso do ensaio pelos cl��nicos.

Modula����o imunol��gica in vitro de células de Langerhans e macr��fagos por drogas utilizadas no manejo de rea����es hans��nicas

As células de Langerhans (CLs) est��o localizadas na epiderme e desempenham um papel chave na indu����o da resposta imune e da toler��ncia imunol��gica. Os macr��fagos s��o células fagoc��ticas que atuam como primeira linha de defesa do organismo, e que est��o envolvidos na forma����o de granulomas em pacientes com hansen��ase. A imunopatogenia da resposta celular nos estados reacionais ainda �� pouco estudada, por��m, diversas evid��ncias sugerem que as drogas prednisona, talidomida, ciclosporina e amitriptilina, utilizadas no controle das rea����es hans��nicas, exercem seus efeitos pela modula����o das fun����es de diferentes células imunocompetentes. O objetivo do presente estudo foi analisar a a����o in vitro das drogas prednisona, talidomida, ciclosporina e amitriptilina sobre a produ����o de citocinas por CLs e macr��fagos de camundongos BALB/c. As CLs foram isoladas, purificadas e cultivadas a partir da epiderme pela t��cnica de ���panning��� e os macr��fagos foram isolados da cavidade peritoneal de camundongos BALB/c. Ap��s 36 h de tratamento com as drogas, os n��veis de TNF-���, IL-12 e IL-10 foram medidos por ELISA. Prednisona, talidomida, ciclosporina e amitriptilina inibiram os n��veis de TNF-��� produzidos pelas CLs, em ambas as concentra����es, no entanto, n��o foi detectada altera����o significativa na produ����o de IL-12. A produ����o de TNF-��� e de IL-12 por macr��fagos peritoneais tamb��m foi diminu��da ap��s o tratamento, por��m os n��veis de IL-10 n��o foram modificados por nenhuma das drogas testadas. Nossos resultados mostram que estas drogas podem modular a resposta imune atrav��s da regula����o das citocinas pr��-inflamat��rias TNF-��� e IL-12 por CLs purificadas da epiderme e por macr��fagos peritoneais, indicando que as citocinas constituem importante alvo de drogas usadas no tratamento dos estados reacionais.

Tratamento com minociclina e transplante intraestriatal de células mononucleares da medula ��ssea ap��s acidente vascular experimental encef��lico

Diversos estudos sugerem que a tetraciciclina semi-sint��tica minociciclina e o transplante de células mononucleares da medula ��ssea (CMMOs) induzem neuroprote����o em modelos experimentais de acidente vascular encef��lico (AVENC). No entanto, poucos investigaram, comparativamente, os efeitos destas duas abordagens terap��uticas ap��s AVENC induzido por microinje����es de endotelina ��� 1 (ET -1). Nesta disserta����o, objetivou-se comparar os efeitos do bloqueio microglial com minociclina com os obtidos pelo transplante intraestriatal de CMMOs na fase aguda ap��s acidente vascular encef��lico experimental, sobre a ��rea de les��o, neuroprote����o, apoptose de recupera����o funcional. Ratos machos adultos, da ra��a Wistar, pesando entre 250 e 350g, foram distribu��dos em quatro grupos experimentais: controle (chamado de Salina) - isqu��mico tratado com salina (N=4), isqu��mico tratado com minociclina (N=4), isqu��mico tratado com CMMOs (N=3) e doador de CMMOs (N=2). Testes comportamentais foram realizados em 1, 3 e 7 dias p��s-isquemia para avaliar a recupera����o funcional entre os grupos. Animais tratados com minociclina receberam 2 doses di��rias de 50mg/kg nos 2 primeiros dias, e 5 aplica����es ��nicas de 25mg/kg (i.p) nos dias subsequentes at�� o sexto dia ap��s a indu����o isqu��mica. 1x106 de CMMOs foram obtidas de ratos da mesma linhagem e transplantadas diretamente no estriato, 24h ap��s a les��o isqu��mica. Todos os animais foram perfundidos 7 dias ap��s a indu����o isqu��mica. Sec����es coronais foram coradas por violeta de cresila para an��lise histopatol��gica geral, e por imunohistoqu��mica para a identifica����o de corpos neuronais (neuN), microglia/macr��fagos ativados (ED1) e células apopt��ticas (Caspase-3). A an��lise histopatol��gica geral mostrou grande palor, perda tecidual e intensa ativa����o microglial/ macrof��gica no estriato de animais tratados com solu����o salina est��ril. O tratamento com CMMO foi mais eficaz do que a minociclina (P<0,05, ANOVA-Tukey) na redu����o do n��mero de microglia/macr��fagos ativados (salina 276,3 �� 9,3); CMMOs 133,8 �� 6,8) e minociclina 244,6 �� 7,1). CMMOs e minociclina reduziram a ��rea de les��o, em 67,75% e 69,1%, respectivamente. Os dois tratamentos promoveram o mesmo n��vel de preserva����o neuronal (p< 0,05) em rela����o ao controle, 61,3 �� 1,5); 86,8 �� 3,4) e 81 �� 3,4). As CMMOs reduziram de forma mais eficaz (p<0,01) o n��mero de células apopt��ticas em rela����o �� minociclina e grupo controle (26,5 �� 1,6); 13,1 �� 0,7) e 19,7 �� 1,1). Ambas as abordagens terap��uticas promoveram recupera����o funcional dos animais isqu��micos. Os resultados sugerem que o tratamento com CMMOs �� mais eficaz na modula����o da resposta microglial e na diminui����o da apoptose do que o tratamento com minociclina, apesar de ambos serem igualmente eficazes para indu����o da neuroprote����o. Estudos futuros devem investigar se o tratamento com minociclina associado ao transplante de CMMOs produzem efeitos sin��rgicos, o que poderia amplificar os n��veis de neuroprote����o observados.

Carcinoma de células escamosas perineal em cabras no Par��

Descreve-se a ocorr��ncia de carcinoma de células escamosas (CCE) bem diferenciado em caprinos de duas propriedades no Estado do Par��. Foram observadas a preval��ncia, a correla����o com a pigmenta����o da regi��o perineal e as caracter��sticas macro e microsc��pica das les��es. As les��es consistiram em tumores no per��neo, com grau de desenvolvimento, di��metro e forma variados. Em uma propriedade no munic��pio de Viseu, dos 347 caprinos, 20 apresentaram CCE (5,8%). A neoplasia s�� foi observada em animais com a regi��o perineal despigmentada. Em outra propriedade, no munic��pio de Garraf��o do Norte, descreve-se a ocorr��ncia de tr��s casos em um rebanho de 400 caprinos (0,75%). A elevada ocorr��ncia deste tumor deve-se, provavelmente, �� despigmenta����o do per��neo e �� cauda curta e elevada das cabras, que exp��e a regi��o perineal �� alta incid��ncia de radia����o ultravioleta naquela regi��o.